TSKgel HILIC Columns for Polar Analytes

A cromatografia líquida de fase normal e a cromatografia líquida de interação hidrofílica (HILIC) são utilizadas principalmente para separar compostos polares e hidrofílicos. No modo de fase inversa, os compostos muito polares não são muitas vezes suficientemente retidos numa fase móvel com baixa percentagem orgânica ou mesmo numa fase móvel 100% aquosa. A ordem de eluição em fase normal é oposta à encontrada em fase reversa para a mesma mistura de compostos. Embora as fases móveis orgânicas não polares e uma fase estacionária de sílica fossem tradicionalmente utilizadas na LC de fase normal, atualmente a maioria das separações é realizada com fases móveis orgânicas aquosas e uma fase estacionária com ligações mais polares. Este modo de HPLC é agora geralmente referido como HILIC, cromatografia líquida de interação hidrofílica.

Utilizando uma coluna de fase amida ou amino-ligada, os compostos polares podem ser retidos por uma fase normal ou por um mecanismo de retenção de cromatografia de interação hidrofílica. As fases móveis típicas em HILIC são tampões aquosos com modificadores orgânicos - principalmente acetonitrilo. Em contraste com o comportamento de retenção em fase reversa, em HILIC, os solutos serão retidos durante mais tempo quando se aumenta a percentagem de acetonitrilo.

As aplicações típicas da HILIC são:

• Análise de polióis, hidratos de carbono ou vitaminas
• Caracterização da glicosilação de proteínas por fluorescência ou deteção por espetrometria de massa
• Separação de péptidos polares, por exemplo, após digestão enzimática de proteínas (mapeamento de péptidos)
• Análise de fármacos polares e separação de metabolitos de fármacos
• Análise LC/MS de compostos polares

Detalhes do produto:

As fases estacionárias TSKgel de fase normal/HILIC são materiais de embalagem à base de sílica uniformemente ligados com distribuições de tamanho de poro estreitas e tamanhos de partículas bem definidos para garantir um elevado desempenho. As colunas TSKgel HILIC estão disponíveis com fases de carbamoil e amino ligadas covalentemente e ambas as fases são estáveis em eluentes 100% orgânicos.

Coluna TSKgel Amide-80:

As colunas TSKgel Amide-80 são embaladas com partículas de sílica esféricas de 2, 3, 5 ou 10 µm ligadas covalentemente com grupos carbamoílo. As colunas TSKgel Amide-80 possuem uma estabilidade superior em sistemas de solventes aquosos/orgânicos. Além disso, são ideais para a análise LC/MS sensível de compostos polares solúveis em água, uma vez que o elevado teor orgânico na fase móvel permite a rápida evaporação do solvente durante a ionização por electrospray. Também disponível nesta linha está uma coluna TSKgel Amide-80 HR que oferece especificações elevadas para a contagem de placas (N = >18.000).

Coluna TSKgel NH2-100:

As colunas de amino TSKgel NH2-100 destacam-se por proporcionarem uma estabilidade química muito melhorada, um pré-requisito para a obtenção de resultados reprodutíveis e fiáveis. Estas colunas são únicas na medida em que o ligando da fase ligada não só tem um grupo amino primário terminal, como esperado, mas o espaçador também incorpora grupos amino secundários e terciários. Os compostos aniónicos são retidos na coluna por interação iónica. Isto permite a utilização de gradientes na concentração de sal, para além de eluições de gradiente com acetonitrilo.