TSKgel HILIC Columns for Polar Analytes

La chromatographie liquide en phase normale et la chromatographie liquide à interaction hydrophile (HILIC) sont principalement utilisées pour séparer les composés polaires et hydrophiles. En mode phase inversée, les composés très polaires ne sont souvent pas suffisamment retenus dans une phase mobile organique à faible pourcentage, voire aqueuse à 100 %. L'ordre d'élution en phase normale est opposé à celui observé en phase inversée pour le même mélange de composés. Bien que des phases mobiles organiques non polaires et une phase stationnaire en silice aient été utilisées traditionnellement dans la CLP en phase normale, la plupart des séparations sont aujourd'hui effectuées avec des phases mobiles organiques aqueuses et une phase stationnaire à liaison plus polaire. Ce mode de CLHP est aujourd'hui communément appelé HILIC (hydrophilic interaction liquid chromatography).

En utilisant une colonne de phase amide ou amino-liée, les composés polaires peuvent être retenus par un mécanisme de rétention de phase normale ou de chromatographie d'interaction hydrophile. Les phases mobiles typiques de la HILIC sont des tampons aqueux avec des modificateurs organiques - principalement l'acétonitrile. Contrairement au comportement de rétention en phase inversée, en HILIC, les solutés seront retenus plus longtemps lorsque l'on augmente le pourcentage d'acétonitrile.

Les applications typiques de l'HILIC sont les suivantes

• Analyse des polyols, des hydrates de carbone ou des vitamines
• Caractérisation de la glycosylation des protéines par détection par fluorescence ou spectrométrie de masse
• Séparation de peptides polaires, par exemple après digestion enzymatique des protéines (cartographie des peptides)
• Analyse des médicaments polaires et séparation des métabolites de médicaments
• Analyse LC/MS de composés polaires

Détails du produit :

Les phases stationnaires TSKgel phase normale/HILIC sont des matériaux d'emballage à base de silice uniformément liés avec des distributions de taille de pore étroites et des tailles de particules bien définies pour assurer une haute performance. Les colonnes TSKgel HILIC sont disponibles avec des phases carbamoyl et amino liées de manière covalente et les deux phases sont stables dans des éluants 100% organiques.

Colonne TSKgel Amide-80 :

Les colonnes TSKgel Amide-80 sont remplies de particules de silice sphériques de 2, 3, 5 ou 10 µm qui sont liées de manière covalente avec des groupes carbamoyl. Les colonnes TSKgel Amide-80 possèdent une stabilité supérieure dans les systèmes de solvants aqueux/organiques. En outre, elles conviennent parfaitement à l'analyse LC/MS sensible de composés polaires solubles dans l'eau, car la forte teneur en matière organique de la phase mobile permet une évaporation rapide du solvant pendant l'ionisation par électrospray. Une colonne TSKgel Amide-80 HR est également disponible dans cette gamme. Elle offre des spécifications élevées pour le nombre de plaques (N = >18 000).

Colonne TSKgel NH2-100 :

Les colonnes aminées TSKgel NH2-100 se distinguent par une stabilité chimique nettement améliorée, une condition préalable à l'obtention de résultats reproductibles et fiables. Ces colonnes sont uniques en ce sens que le ligand de la phase liée n'a pas seulement un groupe amino primaire terminal comme prévu, mais que l'espaceur incorpore également des groupes amino secondaires et tertiaires. Les composés anioniques sont retenus sur la colonne par interaction ionique. Cela permet d'utiliser des gradients de concentration en sel en plus des élutions en gradient avec l'acétonitrile.